Жаңа коронавирус (SARS-CoV-2) нақты уақыттағы мультиплексті ПТР жинағы
Бұл жоғары сезімтал, пайдалануға дайын ПТР жинағы ұзақ мерзімді сақтау үшін лиофилденген форматта (мұздатып кептіру процесі) қол жетімді.Жинақты бөлме температурасында тасымалдауға және сақтауға болады және бір жыл бойы тұрақты.Премикстің әрбір түтігінде кері транскриптаза, Taq полимераза, праймерлер, зондтар және dNTP субстраттарын қоса, ПТР күшейту үшін қажетті барлық реагенттер бар.Оған тек 13ул тазартылған суды және 5ул экстракцияланған РНҚ үлгісін қосу керек, содан кейін оны ПТР аспаптарында іске қосуға және күшейтуге болады.
qPCR құрылғысы келесі талаптарға сай болуы керек:
1. 8 жолақты ПТР түтігінің көлемі 0,2 мл
2. Төрттен астам анықтау арналары бар:
Арна | Қозу (нм) | Эмиссия (нм) | Алдын ала калибрленген бояғыштар |
1. | 470 | 525 | FAM, SYBR Green I |
2 | 523 | 564 | VIC, HEX, TET, JOE |
3. | 571 | 621 | ROX, TEXAS-RED |
4 | 630 | 670 | CY5 |
ПТР платформалары:
7500Нақты уақыттағы ПТР жүйесі, Biorad CF96, iCycler iQ™ нақты уақыттағы ПТР анықтау жүйесі, Stratagene Mx3000P, Mx3005P
Жаңа Coronavirus нуклеин қышқылын анықтау реагентінің суық тізбегін тасымалдау қиындығы
Кәдімгі нуклеин қышқылын анықтау реагенттері алыс қашықтыққа тасымалданған кезде, реагенттердегі ферменттің биоактивтілігінің белсенді болуын қамтамасыз ету үшін (-20±5) ℃ салқын тізбекті сақтау және тасымалдау қажет.Температураның стандартқа жеткеніне көз жеткізу үшін нуклеин қышқылын сынау реагентінің әрбір қорабы үшін тіпті 50 г-нан аз да бірнеше килограмм құрғақ мұз қажет, бірақ ол екі-үш күнге ғана созылуы мүмкін.Өнеркәсіптік тәжірибе тұрғысынан өндірушілер шығарған реагенттердің нақты салмағы контейнердің 10%-дан азын (немесе осы мәннен әлдеқайда аз) құрайды.Салмағының көп бөлігі құрғақ мұздан, мұз пакеттерінен және көбік қораптарынан келеді, сондықтан тасымалдау құны өте жоғары.
2020 жылдың наурыз айында COVID-19 шетелде кең ауқымда тарала бастады және жаңа Coronavirus нуклеин қышқылын анықтау реагентіне сұраныс күрт өсті.Суық тізбектегі реагенттерді экспорттаудың жоғары құнына қарамастан, көптеген өндірушілер оны үлкен мөлшер мен жоғары пайданың арқасында әлі де қабылдай алады.
Алайда, пандемияға қарсы өнімдердің ұлттық экспорттық саясатын жетілдірумен, сондай-ақ адамдар ағыны мен логистикаға ұлттық бақылауды жетілдірумен реагенттерді тасымалдау уақытының ұзаруы мен белгісіздігі орын алды, бұл өнімнің елеулі проблемаларын тудырды. тасымалдау арқылы.Ұзартылған тасымалдау уақыты (жарты айға жуық тасымалдау уақыты өте жиі кездеседі) өнім тұтынушыға жеткенде өнімнің жиі істен шығуына әкеледі.Бұл нуклеин қышқылы реагенттерін экспорттайтын кәсіпорындардың көпшілігін алаңдатты.
ПТР реагентіне арналған лиофилизацияланған технология жаңа коронавирус нуклеин қышқылын анықтау реагентін бүкіл әлем бойынша тасымалдауға көмектесті
Лиофилденген ПТР реагенттерін бөлме температурасында тасымалдауға және сақтауға болады, бұл тасымалдау құнын төмендетіп қана қоймай, сонымен қатар тасымалдау процесінде туындайтын сапа мәселелерін болдырмайды.Сондықтан реагентті лиофилизациялау экспортты тасымалдау мәселесін шешудің оңтайлы жолы болып табылады.
Лиофилизация ерітіндіні қатты күйге дейін мұздатуды, содан кейін су буын вакуум жағдайында сублимациялауды және бөлуді қамтиды.Құрамы мен белсенділігі бірдей ыдыста кептірілген еріген зат қалады.Кәдімгі сұйық реагенттермен салыстырғанда, Liming Bio шығарған толық компонентті лиофилденген Novel Coronavirus нуклеин қышқылын анықтау реагентінің келесі сипаттамалары бар:
Өте күшті жылу тұрақтылығы:ол 56℃ температурада 60 күн бойы стендтік өңдеуде болады, ал реагенттің морфологиясы мен өнімділігі өзгеріссіз қалады.
Қалыпты температурада сақтау және тасымалдау:суық тізбегінің қажеті жоқ, тығыздағышты ашпас бұрын төмен температурада сақтаудың қажеті жоқ, салқын сақтау орнын толығымен босатыңыз.
Қолдануға дайын:барлық компоненттерді лиофилизациялау, жүйе конфигурациясын қажет етпейді, фермент сияқты жоғары тұтқырлығы бар компоненттердің жоғалуын болдырмайды.
Бір түтіктегі мультиплексті мақсаттар:анықтау мақсаты вирус геновариациясын болдырмау үшін жаңа коронавирус ORF1ab генін, N генін, S генін қамтиды.Жалған теріс мәндерді азайту үшін адамның RNase P гені үлгі сапасын бақылауға клиникалық қажеттілікті қанағаттандыру үшін ішкі бақылау ретінде пайдаланылады.